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多肽合成儀的核心功能,是按照預(yù)設(shè)的氨基酸序列,通過(guò)自動(dòng)化的化學(xué)反應(yīng)流程,將氨基酸逐步連接形成多肽鏈,同時(shí)實(shí)現(xiàn)反應(yīng)過(guò)程的準(zhǔn)確控制、雜質(zhì)去除和產(chǎn)物純化,獲得高純度的目標(biāo)多肽。其核心作用圍繞“自動(dòng)化合成、序列準(zhǔn)確控制、高效純化”展開,具體可分為三類:
氨基酸序列拼接。這是其核心功能,多肽的生物活性與其氨基酸序列密切相關(guān),差一個(gè)氨基酸或序列順序錯(cuò)誤,都可能導(dǎo)致多肽失去活性。能嚴(yán)格按照預(yù)設(shè)的序列,將不同種類的氨基酸依次連接到多肽鏈上,通過(guò)準(zhǔn)確控制反應(yīng)條件(如溫度、反應(yīng)時(shí)間、試劑用量),確保氨基酸連接的準(zhǔn)確性,避免序列錯(cuò)誤。
其次是自動(dòng)化高效合成多肽。相較于傳統(tǒng)手動(dòng)合成,實(shí)現(xiàn)了全流程自動(dòng)化,涵蓋氨基酸活化、耦合、脫保護(hù)、洗滌等多個(gè)步驟,無(wú)需人工頻繁添加試劑、監(jiān)控反應(yīng)進(jìn)程。無(wú)論是短鏈多肽(幾個(gè)氨基酸組成)還是中長(zhǎng)鏈多肽(數(shù)十個(gè)氨基酸組成),都能快速完成合成,大幅提升合成效率,同時(shí)降低人工操作帶來(lái)的誤差。
輔助多肽純化與產(chǎn)物保障。合成過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生未反應(yīng)的氨基酸、副產(chǎn)物等雜質(zhì),影響多肽純度。集成了純化模塊,可通過(guò)色譜分離等技術(shù)去除雜質(zhì);同時(shí),設(shè)備通過(guò)嚴(yán)格的反應(yīng)條件控制和洗滌流程,減少雜質(zhì)殘留,確保產(chǎn)出的多肽具備高純度,滿足科研實(shí)驗(yàn)和藥物研發(fā)的嚴(yán)苛要求。

多肽合成儀的工作原理核心是“固相合成法”(目前主流方法),簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō),就是將個(gè)氨基酸固定在固相載體上,再通過(guò)一系列自動(dòng)化的化學(xué)反應(yīng),將后續(xù)多個(gè)氨基酸逐步連接起來(lái),形成多肽鏈,具體可拆解為五個(gè)關(guān)鍵步驟:
固相載體與初始氨基酸固定。首先將一種固相載體(如聚苯乙烯樹脂)放入反應(yīng)柱中,然后將預(yù)設(shè)序列的氨基酸通過(guò)化學(xué)反應(yīng)固定在固相載體上。固相載體的作用是“固定”正在合成的多肽鏈,方便后續(xù)的洗滌、分離操作,避免多肽鏈流失。
氨基酸脫保護(hù)。為了避免氨基酸在連接過(guò)程中發(fā)生錯(cuò)誤反應(yīng),每個(gè)氨基酸的活性基團(tuán)都帶有“保護(hù)基”。當(dāng)需要連接下一個(gè)氨基酸時(shí),合成儀會(huì)自動(dòng)加入脫保護(hù)試劑,去除前一個(gè)氨基酸末端的保護(hù)基,使其露出活性基團(tuán),為與下一個(gè)氨基酸連接做好準(zhǔn)備。
氨基酸活化與耦合。合成儀將下一個(gè)氨基酸加入反應(yīng)柱,同時(shí)加入活化試劑,激活該氨基酸的活性基團(tuán);隨后,兩個(gè)氨基酸的活性基團(tuán)發(fā)生耦合反應(yīng),通過(guò)肽鍵連接在一起,形成二肽鏈(固定在固相載體上)。這一步是氨基酸拼接的核心,設(shè)備會(huì)準(zhǔn)確控制試劑用量和反應(yīng)時(shí)間,確保耦合反應(yīng)充分進(jìn)行。
洗滌與循環(huán)。耦合反應(yīng)完成后,合成儀會(huì)自動(dòng)用洗滌試劑沖洗反應(yīng)柱,去除未反應(yīng)的氨基酸、活化試劑等雜質(zhì);之后重復(fù)“脫保護(hù)-活化-耦合-洗滌”的循環(huán)流程,按照預(yù)設(shè)的氨基酸序列,依次將后續(xù)氨基酸連接到多肽鏈上,直至合成出目標(biāo)長(zhǎng)度的多肽鏈。
多肽切割與純化。當(dāng)多肽鏈合成完成后,合成儀會(huì)加入切割試劑,將多肽鏈從固相載體上切割下來(lái);通過(guò)純化步驟(如液相色譜分離)去除殘留的保護(hù)基、雜質(zhì),獲得高純度的目標(biāo)多肽,完成整個(gè)合成過(guò)程。
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